phi29 DNAポリメラーゼセット
phi29 DNAポリメラーゼは、Bacillus subtilisファージphi29由来のDNA合成酵素です。1)
本酵素は、30℃付近で活性を持ち、高い鎖置換活性と3'→5'エキソヌクレアーゼ活性による優れたプルーフリーディング(校正)活性を有しており、全ゲノム増幅法などのアプリケーションに利用されています。2-4。
特徴
- 中温性酵素⇒30℃付近で活性を持つ
- 高い鎖置換活性⇒等温反応が可能
- 速い合成速度⇒1秒あたり50~200塩基
- 高い伸長性⇒~70kbpを合成可能
- 3'→5'エキソヌクレアーゼ活性⇒低い複製エラー率(Taq DNAポリメラーゼの100~1,000分の1)
使用例1:本製品を使用した環状DNAの増幅(RCA法:Rolling Circle Amplification法)
本製品および他社製品のphi29 DNAポリメラーゼを用いて、pUC18 DNAまたは精製水(NTC:No Template Control)を試料として増幅反応を行いました。反応後、反応液を制限酵素(BamH Ⅰ とEcoR Ⅰ )で処理した後、アガロースゲル電気泳動で増幅産物のサイズを確認しました。pUC18 DNAに由来する増幅産物は、制限酵素処理により約2.7 kbpのバンドとして検出されます。
本製品では非特異的なDNA増幅がみられません。
使用例2:本製品を使用したヒトゲノムDNAの全ゲノム増幅(MDA法:Multiple Displacement Amplification法)
製品一覧
製品番号 | 製品名 | 保存温度 | 規格 | 包装 | 詳細 |
---|---|---|---|---|---|
10195-96 | phi29 DNAポリメラーゼセット | 冷凍 | 分子生物学用 | 1z |
*phi29 DNAポリメラーゼ(0.05 mg/ mL)25 μL×4本、10×Reaction Buffer 100 μL×4本の構成です。
*本製品は、農研機構 食品総合研究所との共同研究で開発されました。
・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、[Cica-Webで確認]ボタンをクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して
関連製品(発売予定)
製品名 | 製品規格 | 備考 |
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6R5S Primer, 100 μM | 分子生物学用 | 詳細はお問合せ下さい |
dNTP Mixture, 各25 mM | 分子生物学用 | 詳細はお問合せ下さい |
ジチオスレイトール(DTT), 1M | 分子生物学用 | 詳細はお問合せ下さい |
ピロフォスファターゼ(PPase), 1 mg/mL | 分子生物学用 | 詳細はお問合せ下さい |
関連設備
オープンクリーンシステム KOACH(コーチ) T500-F
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