ヒトiPS細胞由来腸管上皮モデル作製用培地 
ciKIC® IEC Maturation Medium

経口薬の薬物動態試験における消化管吸収試験モデルとして、従来はヒト結腸癌由来のCaco-2細胞が用いられてきましたが、生体小腸と比べ薬物動態学的な性質・機能には乖離があると指摘されております。具体的には、小腸において重要な薬物代謝酵素であるCYP3A4の発現量の低さ、バリア機能の違い、トランスポーター類の発現パターンの違いなどが挙げられます。
この問題を解決するため、弊社は東京工業大学 生命理工学院 生命理工学系の粂昭苑教授らとの共同研究を行い、生体小腸と類似した性質・機能を持つヒトiPS細胞由来腸管上皮モデルの作製に成功しました。この成果をもとに開発された本培地は、ヒトiPS細胞由来腸管上皮細胞の成熟化に寄与します。作製されたモデルは、薬物や栄養成分の吸収・代謝・安全性評価、薬物間相互作用解析、細菌やウイルスの暴露による腸管免疫研究などへの応用が期待されております。

医薬品開発における課題や、ヒトiPS細胞由来腸管上皮モデルの必要性の詳細については、特集ページ（ヒトiPS細胞由来腸管上皮モデルの作製）もご覧ください。

特長

• 生体小腸と類似したヒト腸管上皮モデルを作製可能
  本培地を用いて作製されたヒト腸管上皮モデルは、生体小腸と近い性能を示します。
  
  • 遺伝子発現プロファイル（各種薬物代謝酵素、トランスポーターなど）
  • CYP3A代謝活性
  • バリア機能
  • 微絨毛の形成（ヒト生体小腸と同程度の長さ）
  詳しくは、弊社の製品パンフレット、もしくは㈱リプロセルの「StemRNA Entero」製品ページをご参照ください。
  　
• 幅広いアプリケーションの可能性
  
  • 経口薬や機能性食品の消化管吸収試験
  • 経口薬や機能性食品の安全性予測
  • 薬物間相互作用試験
  • 腸管免疫に関わる研究

製品の取扱・プロトコールについて

ヒトiPS細胞由来腸管上皮細胞（㈱リプロセル販売の「StemRNA Entero」）を細胞培養用インサートであるad-MED ビトリゲルR2（24 well）に播種し、5日目から本培地を使って培養を行うことでヒト腸管上皮モデルを作製できます。詳しくは取扱説明書と以下のプロトコール動画をご参照ください。

Day 0　　：プロトコール動画①試薬の準備、②細胞の解凍・調製、③細胞の播種
Day 2以降：プロトコール動画④培地交換

■ プロトコール動画① 試薬の準備

■ プロトコール動画② 細胞の解凍・調製

■ プロトコール動画③ 細胞の播種

■ プロトコール動画④ 培地交換

製品一覧

製品番号	製品名	構成	保管方法	詳細
08374-67	ciKIC® IEC Maturation Medium	basal medium 125 mL×1	冷蔵保存 2℃～8℃
		Supplement 1 2.5 mL×1	冷凍保存 -20℃
		Supplement 2 625 μL×1	冷凍保存 -20℃
	24 well用インサート24個分の培養で使い切れる容量設計となっております。
08364-96	ad-MED ビトリゲル®2（24ウェル）	インサート24個 ＋ 24wellプレート1枚	冷蔵保存 0℃～6℃
	本製品と組み合わせて使用するReady-to-useの細胞培養用インサートです。培地交換時にはインサート内のピペット止め構造を利用することで、培養細胞への物理的なダメージを最小限に抑えることが可能です。位相差顕微鏡での観察にも対応しています。製品ページはこちら。
49033-00	StemRNA Entero	凍結細胞 1.8×106 cells/vial ×2 vial	液体窒素
		Entero Thawing Medium 80 mL×1	冷凍保存 -20℃以下
	iPS細胞由来腸管上皮細胞となります（メーカー：株式会社リプロセル、メーカーコード：RCDE001N）。 iPS細胞由来腸管上皮モデルの作製では、こちらの製品と、ciKICR IEC Maturation Medium, ad-MED ビトリゲルR2（24ウェル）を組み合わせて使用してください。
49030-06	Y-27632 二塩酸塩	10 mg	冷凍保存 -20℃以下
	ROCK阻害剤の一つで、粉末の形態となります（メーカー：APExBIO社、メーカーコード：A3008-10）。 Day0にStemRNA Enteroの細胞を融解・播種する際、Entero Thawing Mediumには、こちらのY-27632を終濃度：10 μMとなるよう添加してください。
08144-96	シカジーニアス® RNAプレップキット(組織用)2	50回分
	作製したiPS細胞由来腸管上皮モデルの各種遺伝子発現量を解析する際に、培養細胞中のRNAを簡便に抽出・精製できるスピンカラムタイプのキットです。製品ページはこちら。

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、[Cica-Webで確認]ボタンをクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

関連文献

Shinpei Yoshida, Takayuki Honjo, Keita Iino, Ryunosuke Ishibe, Sylvia Leo, Tomoka Shimada, Teruhiko Watanabe, Masaya Ishikawa, Kazuya Maeda, Hiroyuki Kusuhara, Nobuaki Shiraki, Shoen Kume, Generation of human induced pluripotent stem cell-derived functional enterocyte-like cells for pharmacokinetic studies. Stem Cell Reports , Vol. 16 (2021) 1-14.
doi: 10.1016/j.stemcr.2020.12.017