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シカジーニアス® CDToxin遺伝子リアルタイムPCR検出キット

Clostridioides difficile (旧名:Clostridium difficile) は、偏性嫌気性のグラム陽性桿菌であり、芽胞を形成します。本菌は、一部の健常者の腸管にも常在しますが、抗菌薬の使用等で腸内細菌叢が乱れると異常増殖し、下痢症や偽膜性大腸炎などを引き起こすことがあります。これらの症状は、主に本菌が産生する毒素(toxin A、toxin B)によるものであり、さらに北米や欧州を中心に第三の毒素であるbinary toxinを産生する強毒株も報告されていま す。本菌は芽胞を形成することで環境中で長期間生存でき、アルコールなどに耐性を持つことから、手指やドアノブ等を介した接触感染や経口感染によって伝播しやすく、医療機関等で感染拡大が問題となっています。 本キットは4-plexのリアルタイムPCRで、C. difficileの毒素遺伝子であるtcdA(toxin A)、tcdB(toxin B)、cdtA (binary toxin)とPCR阻害の有無を確認するためのインターナルコントロール(IC)を同時に検出します。

特長

  • C. difficileの毒素遺伝子tcdA(toxin A)、tcdB(toxin B)、cdtA (binary toxin)を同時に検出することが可能です。
  • インターナルコントロールによりPCR阻害の有無を確認できます。
  • リアルタイムPCRにより、約1時間で検出可能です。

キット構成(30回)

  個別名称 容量 数量
試薬A AptaTaq DNA Master(5×Conc.)* 120 μL 1 本
試薬B PCRサプリメント 180 μL 1 本
試薬C プライマー・プローブミックス 150 μL 1 本
試薬D ポジティブコントロール 100 μL 1 本

*AptaTaq DNA Master(5×Conc.)は、Roche Diagnostics K.K.の商品です。

操作手順

s_CDToxinRTPCR_method.png
*1 シカジーニアス® DNA抽出試薬を用いたDNA溶液、またはシカジーニアス® トータルDNA精製キット(組織用)を用いて調製した精製DNAをテンプレートに使用することが可能です。詳細は取扱説明書をご参照ください。

検出対象遺伝子と蛍光検出フィルター、対応装置

検出対象遺伝子 蛍光検出フィルター
tcdA(toxin A) FAM
tcdB(toxin B) VIC
cdtA (binary toxin) ROX(Red610)
インターナルコントロール Cy5

対応装置
FAM, VIC, ROX(Red610), Cy5の4種類の蛍光色素に 対応したリアルタイムPCR装置

社内検討にて性能確認済みの装置
■ Thermo Fisher Scientific社製 QuantStudio®5 
■ Bio-Rad社製 CFX Opus 96   
■ Roche Diagnostics社製 LightCycler® 96   
■ Roche Diagnostics社製 cobas® z 480  * 
 *色補正(蛍光色素のキャリブレーション)が必須

検出例

ポジティブコントロール(試薬D)、ネガティブコントロールとしてTE Buffer、検体(菌株)を試験した際の増幅曲線


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製品一覧

製品番号 製品名 保存温度 規格 包装 詳細
07443₋96 CDToxin耐性遺伝子リアルタイムPCR検出キット 冷凍 分子生物学用 1pack(30回分)
08178-96 シカジーニアス DNA抽出試薬 冷蔵 分子生物学用 1pack(120回分)

★他メーカーの商品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーにご確認ください。
・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、[Cica-Webで確認]ボタンをクリックいただきご確認いただけます。
試薬のご購入とご使用に際して

パンフレット

シカジーニアス®  CDToxin遺伝子リアルタイムPCR検出キット

取扱説明書

シカジーニアス®  CDToxinリアルタイムPCR検出キット

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