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シカジーニアス® ESBL遺伝子型リアルタイムPCR検出キット

ESBL(Extended Spectrum β-Lactamase︓基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ)は、ペニシリン系、第1~3世代 セファロスポリン系、モノバクタム系など幅広いβ-ラクタム系抗菌薬を分解する酵素です。近年、ESBL産生菌は医療関連感染だけでなく、市中への拡散が問題となっています。ESBL遺伝子の多くはプラスミド上に存在し、接合伝達によって菌種を超えて伝播する危険性があります。そのため、ESBL産生菌を早期に検出し、速やかに感染対策を講じることが重要です。本キットは、2種類の4-plexリアルタイムPCRで、代表的な8種類のESBL遺伝子型とPCR阻害の有無を確認するためのインターナルコントロール(IC)を同時に検出します。

特長

  • 8種類のESBL遺伝子型(CTX-M-1 group、CTX-M-9 group、CTX-M-(2, 8, 25) group、SHV、TEM、ESBL型GES)※ を2種類のリアルタイムPCRで検出することが可能です。
  • インターナルコントロールによりPCR阻害の有無を確認できます。
  • リアルタイムPCRにより、約1時間で検出可能です。
    • CTX-M-1 groupとCTX-M-9 groupが融合したキメラ型CTX-Mは、CTX-M-1 group及びCTX-M-9 groupとして検出されます。
    • CTX-M-2 group、CTX-M-8 group、CTX-M-25 groupは同じ蛍光シグナルとして検出され、それぞれのgroupを識別することはできません。
    • non-ESBLのSHV遺伝子及びTEM遺伝子も検出されます。
    • SHV遺伝子と相同性が高いnon-ESBLのLEN及びOKP遺伝子は検出されません。

キット構成(30回)

  個別名称 容量 数量
試薬A AptaTaq DNA Master(5×Conc.)* 240 μL 1 本
試薬B PCRサプリメント 360 μL 1 本
試薬C プライマー・プローブミックス 1 150 μL 1 本
試薬D プライマー・プローブミックス 2 150 μL 1 本
試薬E ポジティブコントロール 150 μL 1 本

*AptaTaq DNA Master(5×Conc.)は、Roche Diagnostics K.K.の商品です。

操作手順

*1 シカジーニアス® DNA抽出試薬を用いたDNA溶液、またはシカジーニアス® トータルDNAプレップキット(組織用)を用いて調製した精製DNAをテンプレートに使用することが可能です。詳細は取扱説明書をご参照ください。

検出対象遺伝子と蛍光検出フィルター、対応装置

Reaction mixture 1

検出対象遺伝子 蛍光検出フィルター
CTX-M-1 group FAM
TEM VIC
CTX-M-9 group ROX(Red610)
インターナルコントロール Cy5

Reaction mixture 2

検出対象遺伝子 蛍光検出フィルター
SHV FAM
CTX-M-(2,8,25) group VIC
ESBL型GES ROX(Red610)
インターナルコントロール Cy5
  • 対応装置
    FAM, VIC, ROX(Red610), Cy5の4種類の蛍光色素に 対応したリアルタイムPCR装置
  •  
  • 社内検討にて性能確認済みの装置
      • Thermo Fisher Scientific社製 QuantStudio®5
      • Bio-Rad社製 CFX Opus 96
      • Roche Diagnostics社製 LightCycler® 96
      • Roche Diagnostics社製 cobas® z 480 *

    *色補正(蛍光色素のキャリブレーション)が必須

検出例

ポジティブコントロール(試薬D)、ネガティブコントロールとしてTE Buffer、検体(菌株)を試験した際の増幅曲線

Reaction mixture 1

Reaction mixture 2

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製品一覧

製品番号 製品名 保存温度 規格 包装 詳細
07498-96 シカジーニアス® ESBL遺伝子型リアルタイムPCR検出キット 冷凍 分子生物学用 1pack
(30回分)
08178-96 シカジーニアス® DNA抽出試薬 冷蔵 分子生物学用 1pack
(120回分)
72101 クロモアガー™ ESBL生培地 冷蔵 分子生物学用 10枚
72120 クロモアガー™ オリエンタシオン/ESBL分画培地 冷蔵 分子生物学用 10枚
08088-96 シカジーニアス® トータルDNAプレップキット(組織用) 常温 分子生物学用 1pack
(100回分)


精度管理用標準菌株

製品番号 製品名 保存機関/
番号
規格 包装 詳細
49844-36 クレブシエラ ニューモニエ KWIK-STIK™ ATCC /
BAA-1706
分子生物学用 2pack


★他メーカーの商品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーにご確認ください。
・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、[Cica-Webで確認]ボタンをクリックいただきご確認いただけます。
試薬のご購入とご使用に際して

パンフレット

シカジーニアス®  ESBLリアルタイムPCR検出キット

取扱説明書

シカジーニアス®  ESBLリアルタイムPCR検出キット

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