シカジーニアス® ESBL遺伝子型リアルタイムPCR検出キット

ESBL(Extended Spectrum β-Lactamase︓基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ)は、ペニシリン系、第1~3世代 セファロスポリン系、モノバクタム系など幅広いβ-ラクタム系抗菌薬を分解する酵素です。近年、ESBL産生菌は医療関連感染だけでなく、市中への拡散が問題となっています。ESBL遺伝子の多くはプラスミド上に存在し、接合伝達によって菌種を超えて伝播する危険性があります。そのため、ESBL産生菌を早期に検出し、速やかに感染対策を講じることが重要です。本キットは、2種類の4-plexリアルタイムPCRで、代表的な8種類のESBL遺伝子型とPCR阻害の有無を確認するためのインターナルコントロール(IC)を同時に検出します。
特長
- 8種類のESBL遺伝子型(CTX-M-1 group、CTX-M-9 group、CTX-M-(2, 8, 25) group、SHV、TEM、ESBL型GES)※ を2種類のリアルタイムPCRで検出することが可能です。
- インターナルコントロールによりPCR阻害の有無を確認できます。
- リアルタイムPCRにより、約1時間で検出可能です。
- CTX-M-1 groupとCTX-M-9 groupが融合したキメラ型CTX-Mは、CTX-M-1 group及びCTX-M-9 groupとして検出されます。
- CTX-M-2 group、CTX-M-8 group、CTX-M-25 groupは同じ蛍光シグナルとして検出され、それぞれのgroupを識別することはできません。
- non-ESBLのSHV遺伝子及びTEM遺伝子も検出されます。
- SHV遺伝子と相同性が高いnon-ESBLのLEN及びOKP遺伝子は検出されません。
キット構成(30回)
| 個別名称 | 容量 | 数量 | |
|---|---|---|---|
| 試薬A | AptaTaq DNA Master(5×Conc.)* | 240 μL | 1 本 |
| 試薬B | PCRサプリメント | 360 μL | 1 本 |
| 試薬C | プライマー・プローブミックス 1 | 150 μL | 1 本 |
| 試薬D | プライマー・プローブミックス 2 | 150 μL | 1 本 |
| 試薬E | ポジティブコントロール | 150 μL | 1 本 |
*AptaTaq DNA Master(5×Conc.)は、Roche Diagnostics K.K.の商品です。
操作手順
検出対象遺伝子と蛍光検出フィルター、対応装置
Reaction mixture 1
| 検出対象遺伝子 | 蛍光検出フィルター |
|---|---|
| CTX-M-1 group | FAM |
| TEM | VIC |
| CTX-M-9 group | ROX(Red610) |
| インターナルコントロール | Cy5 |
Reaction mixture 2
| 検出対象遺伝子 | 蛍光検出フィルター |
|---|---|
| SHV | FAM |
| CTX-M-(2,8,25) group | VIC |
| ESBL型GES | ROX(Red610) |
| インターナルコントロール | Cy5 |
- 対応装置
FAM, VIC, ROX(Red610), Cy5の4種類の蛍光色素に 対応したリアルタイムPCR装置 - 社内検討にて性能確認済みの装置
- Thermo Fisher Scientific社製 QuantStudio®5
- Bio-Rad社製 CFX Opus 96
- Roche Diagnostics社製 LightCycler® 96
- Roche Diagnostics社製 cobas® z 480 *
*色補正(蛍光色素のキャリブレーション)が必須
検出例
ポジティブコントロール(試薬D)、ネガティブコントロールとしてTE Buffer、検体(菌株)を試験した際の増幅曲線
Reaction mixture 1
Reaction mixture 2
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製品一覧
精度管理用標準菌株
| 製品番号 | 製品名 | 保存機関/ 番号 |
規格 | 包装 | 詳細 |
|---|---|---|---|---|---|
| 49844-36 | クレブシエラ ニューモニエ KWIK-STIK™ | ATCC / BAA-1706 |
分子生物学用 | 2pack | ![]() |
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